Mesin pengekstrakan dan pengesanan asid nukleik automatik sepenuhnya New Tech

Lima kekuatan:
● Instrumen dikonfigurasikan dengan pengekstrakan asid nukleik dan langkah yang ditulenkan
● Instrumen dikonfigurasikan dengan modul pengekstrakan ultrasonik
● Instrumen dikonfigurasikan dengan automatik sepenuhnya
● Instrumen dikonfigurasikan dengan penguatan suhu berubah-ubah
● Instrumen dikonfigurasikan dengan kit reagen tertutup sepenuhnya

1. Adakah reagen pengesanan asid nukleik perlu diekstrak dan ditulenkan?
Prinsip pengesanan asid nukleik adalah seperti berikut: di bawah tindakan primer, polimerase DNA digunakan untuk melakukan penguatan tindak balas berantai pada templat DNA/RNA (memerlukan transkripsi terbalik NA), dan kemudian jumlah isyarat pendarfluor yang dikeluarkan dikesan untuk menentukan sama ada sampel mengandungi asid nukleik (DNA/RNA) patogen yang akan dikesan.

1) Sampel yang belum diekstrak atau ditulenkan mungkin mengandungi banyak komponen yang menjejaskan keputusan akhir: nuklease (yang boleh melarutkan asid nukleik sasaran dan menyebabkan negatif palsu ), protease (yang boleh mengurangkan polimerase DNA dan menyebabkan negatif palsu), logam berat garam (yang membawa kepada penyahaktifan sintase dan menyebabkan positif palsu ), PH terlalu berasid atau terlalu beralkali (yang boleh menyebabkan tindak balas gagal), RNA tidak lengkap (membawa kepada kegagalan transkripsi songsang negatif palsu).

2) Sesetengah sampel sukar untuk dikuatkan secara langsung: Gram-positif dan beberapa parasit, kerana dinding selnya yang tebal dan struktur lain, jika mereka tidak melalui proses pengekstrakan dan penulenan asid nukleik, kit bebas pengekstrakan mungkin gagal untuk itu. sampel.

Oleh itu, adalah disyorkan untuk memilih kit ujian atau instrumen yang dikonfigurasikan dengan langkah pengekstrakan asid nukleik.

2. Pengekstrakan kimia atau pengekstrakan pemecahan ultrasonik fizikal?
Secara amnya, pengekstrakan kimia boleh digunakan untuk kebanyakan prarawatan dan Pemurnian.Walau bagaimanapun, dalam bakteria Gram-positif berdinding tebal dan beberapa parasit, ia juga berlaku bahawa pengekstrakan kimia tidak boleh mendapatkan templat asid nukleik yang berkesan, mengakibatkan pengesanan negatif palsu.Di samping itu, pengekstrakan kimia sering menggunakan agen kuat, jika elusi tidak menyeluruh, mudah untuk memperkenalkan alkali kuat ke dalam sistem tindak balas, mengakibatkan keputusan yang tidak tepat.

Pemecahan ultrasonik menggunakan penghancuran fizikal, yang telah berjaya digunakan oleh GeneXpert, sebuah perusahaan terkemuka dalam bidang POCT untuk kegunaan manusia, dan mempunyai kelebihan mutlak dalam pengekstrakan asid nukleik beberapa sampel kompleks (seperti Mycobacterium tuberculosis).

Oleh itu, adalah disyorkan untuk memilih kit ujian atau instrumen yang dikonfigurasikan dengan langkah pengekstrakan asid nukleik.dan ia adalah optimum jika terdapat modul pengekstrakan ultrasonik.

3. Manual , Separa automatik dan automatik sepenuhnya?
Ini adalah masalah kos buruh dan kecekapan kerja.Pada masa ini, hospital haiwan peliharaan tanpa kakitangan yang mencukupi, dan pengekstrakan dan pengesanan asid nukleik merupakan kerja yang memerlukan kemahiran dan pengalaman tertentu.Tidak dinafikan bahawa mesin pengekstrakan dan pengesanan asid nukleik automatik sepenuhnya adalah pilihan yang tepat.

4. Penguatan suhu malar atau penguatan suhu berubah?
Tindak balas penguatan ialah pautan pengesanan asid nukleik, dan teknologi profesional yang terlibat dalam pautan ini adalah kompleks.Secara kasarnya, enzim digunakan untuk menguatkan asid nukleik.Dalam proses penguatan, isyarat pendarfluor yang dikuatkan atau isyarat pendarfluor terbenam dikesan.Secara umumnya, lebih awal isyarat pendarfluor muncul, lebih besar kandungan gen sasaran sampel.

Penguatan suhu malar ialah penguatan asid nukleik pada suhu tetap, manakala penguatan suhu berubah-ubah ialah penguatan kitaran dengan ketat mengikut sambungan denaturasi-penyepuhlindapan.Masa penguatan suhu malar telah dijalankan, manakala masa penguatan suhu berubah-ubah banyak dipengaruhi oleh kadar kenaikan dan penurunan suhu instrumen (pada masa ini, banyak pengeluar telah dapat melakukan 40 kitaran penguatan dalam kira-kira 30 minit).

Jika keadaan makmal baik dan pengezonan adalah ketat, adalah munasabah untuk mengatakan bahawa perbezaan ketepatan antara kedua-duanya tidaklah besar.Walau bagaimanapun, penguatan suhu berubah akan mensintesis lebih banyak produk asid nukleik dalam masa yang agak singkat.Bagi makmal tanpa pengezonan yang ketat dan kakitangan latihan profesional, risiko kebocoran aerosol asid nukleik akan menjadi lebih besar, positif palsu berlaku sebaik sahaja kebocoran berlaku, dan yang amat sukar untuk dihapuskan.

Di samping itu, penguatan suhu malar juga lebih terdedah kepada penguatan bukan spesifik apabila sampel adalah kompleks (suhu tindak balas relatif lebih rendah, dan lebih tinggi suhu lanjutan, lebih baik kekhususan mengikat primer).

Setakat teknologi semasa, penguatan suhu berubah-ubah adalah lebih dipercayai.

5. Bagaimana untuk mengelakkan risiko kebocoran produk penguatan asid nukleik?
Pada masa ini, banyak pengeluar memilih tiub PCR jenis kelenjar sebagai tiub tindak balas asid nukleik, yang dimeterai oleh geseran, dan denaturasi suhu dalam denaturasi suhu berubah dalam penguatan PCR suhu berubah mencapai 90 darjah.
Centigrade .Proses pengembangan berulang dengan haba dan penguncupan dengan sejuk adalah cabaran besar kepada pengedap tiub PCR, dan tiub PCR jenis kelenjar agak mudah menyebabkan kebocoran.

Adalah lebih baik untuk menggunakan tindak balas dengan kit/tiub yang tertutup sepenuhnya untuk mengelakkan kebocoran produk tindak balas .Ia akan menjadi sempurna jika terdapat kit yang tertutup sepenuhnya untuk pengekstrakan dan pengesanan asid nukleik.

Jadi mesin pengekstrakan dan pengesanan asid nukleik automatik sepenuhnya New Tech mempunyai lima pilihan optimum di atas.